68. A primer for homebrew antibody

Researchat.fm

kyonさんをゲストに迎え、自作のモノクローナル抗体をつくるプロトコルとその魅力について教えてもらいました。

Shownotes

• 抗体 (antibody)…免疫グロブリンの総称。参考ページ:抗体とは (MBLのwebページ)、抗体とは？ (中外製薬webページ)
• 抗体ガイド 4. ポリクローナル抗体とモノクローナル抗体 (abcamのwebページ)
• モノクローナル抗体の作り方 (中外製薬webページ)
• 重鎖・短鎖…抗体を構成する部位。参考ページ: Sigmaのwebページ
• エピトープ…抗体の抗原認識部位
• 免疫染色…抗体を用いて目的のタンパク質のみを染めることで可視化する手法。最も一般的なのは蛍光でラベルする蛍光免疫染色 (Immunofluorescence staining)
• ELISA
• ウェスタンブロッティング
• 免疫沈降 (Immunoprecipitation)
• ミエローマ…マウス骨髄腫由来の細胞株。免疫グロブリン (抗体) を大量に生産する
• B細胞…免疫機構を担うリンパ球の一種
• 細胞融合…細胞同士の膜の融合によって、2つの細胞を１つにする技術。細胞は核も融合し染色体数が4倍体になるが、徐々に減少し、あるレベルで安定化し増殖する細胞株となる (実験医学webページより一部改変して抜粋)
• ハイブリドーマ…B細胞とミエローマが融合した細胞
• PIWI family…kyonが研究対象にしている遺伝子。詳細はep.14へGO!
• アジュバント…ワクチンと一緒に投与することで、免疫効果を高める
• Hamers-Casterman et al., Nature (1993) … ラクダ科の動物の抗体について初めて報告した論文
• 蛇毒抗体の人
• ポリエチレングリコール (PEG) (Wikipedia)
• エレクトロポレーション…電気穿孔法ともいう。電流パルスにより細胞に物理的な刺激を与え、細胞膜を一時的に破壊し透過性を上げることで、目的の物質を能動的に入れ込む技術
• Neon™ Transfection System … 針みたいなエレポ
• MIHS法…横浜国立大学の栗原靖之先生のグループが開発したハイブリドーマの作製方法

Editorial notes

• 完全に余談ですが、実験のやる気がでない日はこの動画が脳内再生されます。Forget about doing a western blot~♪ (kyon)
• いつか抗体も自作したくなった (Soh)
• バンバン抗体つくりましょう。途中だいぶぼんやりしていて的外れな質問をしてしまった…(細胞融合もうちょい話したかった感)(tadasu)
• 抗体と言えばブレンパワードのアンチボディ格好良いですよね(coela)